DB65∕T 4800-2024 绵羊微创活体采卵技术操作规程(新疆维吾尔自治区)

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2024/9/5

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ICS 6502030,CCS B 43 DB6S,新疆维吾尔 自治区地方标准,DB65/T 4800—2024,绵羊微创活体采卵技术操作规程,ノ 丒',Code of practice for minimal invasive ovum pick-up in sheep,2024 -07-11 发布 2024 -09 -1 〇实施,新疆维吾尔自治区市场监督管理局 发布,DB65/T 4800—2024,刖 □,本文件按照GB/T 11—2020《标准化工作导则 第1部分;标准化文件的结构和起草规则》的规定,起草,本文件由新疆维吾尔自治区畜牧兽医局提出、归ロ并组织实施,本文件起草单位:新疆畜牧科学院生物技术研究所、新疆畜牧科学院畜牧研究所、新疆上品美羊科,技有限公司。 .,本文件主要起草人:汪立芹、林嘉鹏、李亮、汪建国、吴阳升、郝耿、陈莹、牛志刚、李杰、薛利、,梁红艳、刘志强、史洪オ,本文件实施应用中的疑问,请咨询新疆畜牧科学院生物技术研究所,对文件的修改意见建议,请反馈至新疆维吾尔自治区畜牧兽医局(乌鲁木齐市新华南路408号)、,新疆畜牧科学院生物技术研究所(乌鲁木齐市经济技术开发区阿里山街468号)、新疆维吾尔自治区市,场监督管理局(乌鲁木齐市新华南路167号),新疆维吾尔自治区畜牧兽医局联系电话:0991-8568089:传真0991-8527722;邮编:830004,新疆畜牧科学院生物技术研究所联系电话:0991-3075299;传真:0991-3075270;邮编:830022,新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话:0991-281875〇;传真0991-2311250;邮编:830004,I,DB65/T 4800—2024,绵羊微创活体采卵技术操作规程,1范围,本文件规定了绵羊微创活体采卵的技术操作程序,规定了供体的选择、供体激素处理、供体微创活,体采卵和卵母细胞收集技术的要求,本文件适用于绵羊微创活体采卵技术操作,2规范性引用文件,下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本,文件,NY/T 1571羊胚胎移植技术规程,DB65/T 4073成年绵羊体外胚胎生产技术操作规程,DB65/T 4204绵羊幼羔体外胚胎生产技术操作规程,DB65/T 4497绵羊腹腔镜定时输精技术操作规程,3术语和定义,下列术语和定义适用于本文件,31,绵羊微创活体采卵 minimal invasive ovum pick-up in sheep,使用促卵泡素对供体母羊进行处理,利用腹腔镜进行微创活体卵母细胞采集、收集和洗漆等一系列,操作的技术,4供体的选择,选择体质健壮、膘情适中、无遗传疾病、生殖系统疾病和传染性疫病、年龄在10月龄至5岁的母羊,作为卵母细胞采集的供体。重复采卵的供体,应间隔2周以上,5供体激素处理,5.1 药品及器材,所需药品及器材按照NY/T 1571、DB65/T 4073、DB65/T 4204和DB65/T 4497的规定执行,5.2 供体激素处理方法,52.1供体母羊放置阴道海绵栓或C1DR,记为0d, 9 d开始肌肉注射FSH (促卵泡素),早、晚间隔,1,DB65/T 4800—2024,约12 h各注射1次,连续3 d,共6次。FSH注射时间及剂量见附录A,522注射第6针后间隔12 h,对供体进行微创活体采集卵母细胞,操作完成后取出海绵栓,6供体微创活体采卵,6.1 术前准备,6.1.1 供体微创活体采卵前24 h应禁饮禁食,6.1.2 将手术室及手术器具清洁消毒,室温维持在20。。.25,61.3供体仰卧手术架上并保定,按照每1 kg体重0,1 mg.03 mg的用量肌肉注射静松灵,61.4确定腹腔镜打孔部位在离乳房前端约5 cm处,6.1.5 刮去打孔部位的羊毛,用加有新洁尔灭的消毒水将备皮部位清洗干净,6.1.6 用2%.4%的碘酒涂抹打孔部位消毒5 min,再用75%的酒精脱碘,6.2 微创釆卵,62.1将采卵针通过导管连接到试管上,试管内提前加入3 mL抽卵液,622将供体未刮毛部位用创布覆盖并固定;使用8 mm穿刺器分别在距离乳房5 cm腹中线的左侧、,中间和右侧各穿刺ー小孔,左侧孔插入腹腔镜光源、,中间孔插入采卵针,右侧孔插入抓钳,623操作人员使用腹腔镜找到卵巢,用抓钳将其固定,62.4打开负压泵(压カ宜在1 MPa.1.5 MPa),釆卵针对准卵泡刺入,卵泡凹陷,卵泡液及卵母细,胞顺导管吸入收集试管,62.5连续采集4个.6个卵泡后,抽出采卵针,吸取抽卵液洗涤采卵针和导管,ー并回收到试管中,6.3 供体术后处理,供体进行微创采卵后,应对伤ロ进行消毒处理,并观察供体进食等活动状况,7卵母细胞的收集,7.1 弃去试管内卵泡液上清,留约2 mL沉淀液,7.2 倒入60 mm培养皿内,用抽卵液洗涤试管底部3次,ー并倒入培养皿,在体视显微镜下捡出所有,卵母细胞,放入装有3 mL抽卵液的35 mm培养皿内,73卵母细胞的收集所需药品及器材按照DB65/T 4073的规定执行,2,DB65/T 4800—2024,附录 A,(资料性),FSH注射时间及剂量,FSH注射时间及剂量见表A1,表A.1注射时间及剂量,放栓时间0 d 9 d 10 d 11 d 12 d,早,放置海绵栓或CIDR,2 mL (100 mg) 15 mL (75 mg) 1 mL (50 mg) 微创活体采卵、,晩2 mL (100……

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